1.引言：
尼古丁，又稱煙堿，分子式為C10H14N2，是煙草生物堿中具有高毒性的化合物之一。它是一種難聞、味苦，無色透明的油質液體，揮發(fā)性強，在空氣中極易氧化成暗灰色，能迅速溶于水及酒精中，通過口鼻支氣管粘膜很容易被機體吸收.粘在皮膚表面的尼古丁亦可被吸收滲入體內。
測定煙草中尼古丁的方法很多，如大量國內外文獻描述的氣相色譜法、液相色譜法、離子色譜法 、電化學法等。有關分光光度法測定尼古丁含量的文獻也不少，本文在前人的研究基礎上，著重講述了利用簡單分光光度法測定尼古丁含量的研究，該方法的理論基礎是尼古丁在堿性溶液中會被高錳酸鉀氧化形成綠色產(chǎn)物，通過測量該物質的吸收值來得到卷煙中的尼古丁量。該法簡單實用，且具有相當好的準確度和靈敏度，適用于快速、小批量地分析卷煙樣品中尼古丁的含量，具有實用價值。

2.實驗部分：
2.1.主要儀器和試劑：
分光光度計；酸度計；恒溫水浴鍋；
尼古丁標準溶液：1000µg/ml尼古丁，由德國進口高純尼古丁配置而成高錳酸鉀溶液，0.125mol/L：醋酸鋅溶液，1.0mol/L；K4Fe（CN）6溶液，10.6%（w/v），溶解6.10gK4Fe（CN）6·3H2O于50ml蒸餾水中。

2.2.實驗方法：準備移取所需的尼古丁量，加入2m16.25mol/ LNaOH到25ml的容量瓶中，輕微地旋轉混勻，然后加入1.4ml0.0125mol/LKMnO4，再用20m1蒸餾水添加到容量瓶中，用水浴100℃加熱此混合液7.5min，冷卻至室溫再用蒸餾水定容至刻度線，振蕩混勻，并用1cm的吸收池在610nm下測量其吸光度值。

2.3.校準曲線：在最優(yōu)化條件下（CKMnO4 =7×10-4mol/L；CNaOH=0.5mol/L；加熱溫度100℃；加熱時間7.5min），系統(tǒng)在0.1～7.5µg/ml的濃度范圍內遵守比爾定律，且具有0.9996（n=6）的相關系數(shù).此法的檢測限為0.08µg/ml。10次重復測定4µ g/ml試樣，再現(xiàn)性很好，相對偏差為2.17%。

2.4.尼古丁的萃取過程：萃取方法是建立在Rai等的實驗方法基礎之上的。把磨過的一定質量的尼古丁樣品放置在100ml的燒杯中，加10ml甲醇，用玻璃棒攪拌，靜置30min。再加lml2mol/LNaOH及25ml蒸餾水，整個過程都需要攪拌。在水浴中加熱混合液，并沸騰1min，冷卻，用No.41高級濾紙（0.45µ m）過濾溶液到50ml2容量瓶中，沖洗燒杯并把洗液輕輕倒出流過濾紙與濾液匯合。加1ml醋酸鋅溶液到濾液中，混勻，再加入1mlK4Fe（CN）6溶液，振蕩并用蒸餾水稀釋到標線.離心分離5min，把上層液倒入50ml燒杯中，丟棄殘渣。往剛才獲得的上層液中加1mg漂白土，混勻后再進行離心分離5min，丟棄上層液（倒出上層液），用蒸餾水沖洗殘留物再次離心分離5min。倒出上層液，留下殘留物，往里面加入5ml的0.01mol/LNaOH并加熱。用No.41高級濾紙過濾以上所得溶液，濾液流入50m1容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度線，按推薦的步驟分析尼古丁含量。     

3.結果與討論：在堿性條件下，尼古丁會與KMnO4反應生成一種綠色產(chǎn)物，于MnO-4轉變?yōu)?/FONT>MnO2-4， 這種綠色產(chǎn)物在波長610nm處有最大吸光度所示，此吸收值直接與尼古丁的含量有關，可以用來作痕量分析測定。反應溶液的吸收光譜試劑加入的先后順序非常重要。實驗過程中，首先將KMnO4與NaOH混合加熱，然后加入尼古丁，發(fā)現(xiàn)實驗結果的靈敏度很低；然后又將KMnO4與尼古丁混合加熱則發(fā)現(xiàn)形成了棕色的物質。再加入NaOH同時加熱時，此棕色物質會消失。其后又先把NaOH加入到尼古丁中，發(fā)現(xiàn)立即會形成深藍色物質，此類似現(xiàn)象與前人的研究結果相似。因此，只有將尼古丁、NaOH和KMnO4一起混勻并同時加熱，形成綠色物質，加入順序為尼古丁、NaOH、KMnO4時最佳，此反應必須依賴于各參數(shù)值，如KMnO4，NaOH的量，反應的溫度等條件會影響到最后的反應結果，因此要逐個考慮以獲得更好 的靈敏度。